明日叶查尔酮对增强免疫力和抗运动性疲劳效果

研究地点：

• 唐山师范学院体育系，河北唐山

摘    要

目的

研究明日叶查尔酮增强过度训练小鼠的免疫力及抗疲劳的能力。

方法

建立雄性ICR 小鼠8 周跑台的过度训练模型，将模型小鼠分为4 个免疫大组，每个免疫大组又分为低、中、高三个剂量组、过度训练组及阳性药物对照组(n=10)，各剂量组以不同剂量的明日叶查尔酮灌胃并分别与过度训练组和阳性对照组进行比较，评价过度训练小鼠抗疲劳能力相关指标，并通过体液免疫、细胞免疫、单核-巨噬细胞功能和NK 细胞活性评价其免疫能力。

结果

与过度训练组比较，查尔酮中、高剂量组的肌、肝糖原显著升高(P<0.05)，血清乳酸脱氢酶、血尿素氮、血清肌酸激酶显著降低(P<0.05)，并与阳性对照组没有显著差异；中、高剂量明日叶查尔酮能够提高NK 细胞活性，促进小鼠抗体形成细胞增殖，促进脾淋巴细胞增殖转化。

结论

明日叶查尔酮具有较好缓解运动性疲劳、增强免疫力的作用。

关键词：明日叶查尔酮；过度训练；免疫；抗运动性疲劳

英文摘要

Study on Effect of Ashitaba Chalcone on the Strengthen Immune Function and Anti-motor Fatigue

 

Abstract: Objective: To investigate the effects of Ashitaba chalcone on the strengthen immune function and anti-motor fatigue.

Methods: 8 weeks treadmill model of overtraining mice model were established. Overtraining mouse were divided into four immune groups. Every group was divided into low dose group, middle group, high group, overtraining group and positive medicine group. Ashitaba chalcone of different contents were gavaged. The ability of anti-fatigue and immunity of overtraining mice were investigated.

Results：Compared with overtraining group, the contents of muscle glycogen and hepatic glycogen obviously increased in middle and high dose group (P<0.05), serum lactate dehydrogenase, creatine kinase and blood urea nitrogen decreased (P<0.05). Ashitaba chalcone of middle and high dose can promote the proliferation of antibody-producing cells, the activity of natural killer, the proliferation of mouse spleen lymphocytes and transformation of mouse spleen lymphocytes.

Conclusion：In conclusion, Ashitaba chalcone has a good effect of anti-motor fatigue activity and enhance immunity.

Keywords: Ashitaba chalcone; overtraining; immunity; anti-motor fatigue

明日叶是一种多年生草本植物。长期以来人们将其作为一种蔬菜食用。明日叶有多种功效，包括抗癌、抗氧化、降血糖、降血脂等。其中主要的功效物质是明日叶中的查尔酮。近年来，明日叶查尔酮的功效研究主要针对其抗肿瘤、降低血糖和血脂方面[1,2]。

运动员作为一个特殊人群，长期的高强度运动训练和比赛很容易产生运动疲劳[3]。运动性疲劳是人体运动过程中出现的生理现象，是机体的一种氧化应激反应，是一种警报性信号，疲劳将引起运动能力下降， 机体免疫力下降，疲劳的程度也能体现人体机能的生化变化。自从第五届国际运动生物化学会议（1982）明确提出运动性疲劳的概念，科研人员对增加机体抗氧化能力，增强免疫力，延缓运动性疲劳方面的研究逐渐增多。

如何增强运动员机体免疫力，延缓运动性疲劳的发生一直是运动医学领域重点关注的问题之一[3,4]。

鉴于明日叶查尔酮具有极强的抗氧化能力，本实验采用雄性ICR小鼠过度训练运动模型，研究明日叶查尔酮对过度训练小鼠增强免疫力、抗疲劳的效果。

 

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

明日叶查尔酮 某高新科技有限公司；红景天西洋参胶囊 广州赛健生物科技有限公司；血清睾酮、血清皮质酮测定试剂盒、肌/肝糖原测定试剂盒、绵羊红细胞（SRBC）、Hank’s 液（pH 7.2-7.4）、RPMI1640培养液、小牛血、Con A、PMS、MTS 南京建成生物工程研究所；Percp -CD3+、FITC-CD4+、PE-CD8+ 美国R&D公司。

1.2 仪器与设备

动物跑台 淮北正华生物仪器设备有限公司；BD FACSCalibur流式细胞仪 美国BD公司；DL-CG2N超净工作台 北京东联哈尔仪器公司；HW.SY11-KP3恒温水浴锅 北京市长风仪器仪表公司；5418R冷冻高速离心机Ependorff 公司；FRIM可见光分光光度计 法国SECOMAM公司；MCO-15AC CO2培养箱 日本SANYO公司；IX71倒置显微镜 日本OLYMPUS公司；HBS-1096酶标仪 上海精密仪器仪表有限公司；FSH-2型匀浆机 江苏省金坛市环宇科学仪器厂。

1.3 方法

1.3.1 明日叶查尔酮灌胃液的配置

明日叶查尔酮与蒸馏水按照一定比例混合，得到浓度为40mg/mL、80mg/mL、200mg/mL 的灌胃液，备用。

1.3.2 模型制备、分组及运动训练方案

雄性ICR 小鼠(北京维通利华实验动物技术有限公司)，5 周龄，体重22.8±2.1g。普通饲料喂养1 周后，随机分为四个免疫大组（免疫组1-4）。每个免疫组各有过度训练组、阳性对照组和明日叶低、中、高剂量组，每组10 只小鼠，每个免疫组共50 只老鼠。

过度训练组：以运动模型为依据每天进行相应训练，每天补充同剂量的蒸馏水。

阳性对照组：以运动模型为依据每天进行相应训练，并给以红景天西洋参胶囊。红景天西洋参胶囊用蒸馏水配制成50mg/mL 的溶液，以说明书推荐用量经折算后的小鼠用量200mg/kg 进行灌胃。每天运动前1 小时进行灌胃，每只小鼠每天灌胃1 次，每次4 mL/kg。

明日叶低、中、高剂量组：以运动模型为依据每天进行相应训练，并给以明日叶查尔酮溶液。每天运动前1 小时进行灌胃，每只小鼠每天灌胃1 次，每次为4mL/kg。

运动模型：在顾明的运动模型[5]基础上，结合动物实际行为表现，建立了适合本研究的动物模型。

方案：8 周跑台训练，跑台的坡度1°。先进行1 周的适应性训练10 m/min×30 min。之后正式训练，每周训练6 天，休息1 天，每次从10 m/min 开始，每5min 速度增加5 m/min，直至45 m/min 结束训练。观察并记录动物的一般情况(毛色、活动、摄食量、死亡率等情况)及训练情况(跑步速度，动作协调性，精神疲倦情况，是否腹卧位、垂头，刺激后有无反应)，训练过程中观察小鼠精神状态、饮食、睡眠等情况。

1.3.2 指标测定

动物末次运动训练后，禁食12 小时，小鼠眼球取血，血液离心得血清，备用；脱颈处死取小鼠肝脏和腿部肌肉迅速用锡纸包裹投入液氮冷冻，-80℃保存，进行血清睾酮、血清皮质醇、肌糖原、肝糖原、血清乳酸脱氢酶（LDH）、血尿素氮（BUN）和血清肌酸激酶（CK）测定。以上指标分别按照试剂盒进行操作。

各免疫组分别进行以下免疫功能测定。免疫组1：迟发性变态反应（DTH）、血清半数溶血值（HC50）、抗体形成细胞数（PFC）试验；免疫组2：腹腔巨噬细胞吞噬功能试验；免疫组3：碳廓清试验；免疫组4：ConA诱导小鼠脾淋巴细胞转化试验、NK 细胞活性测定。

1.4 免疫功能结果判定

依据《保健食品检验与评价技术规范》[6] 增强免疫力功效的判定标准进行。在对免疫功能的评价中，体液免疫、细胞免疫、单核-巨噬细胞吞噬功能和NK 细胞活性四个方面中有两个方面结果阳性，即可判定该受试物具有增强免疫力的作用。而前三方面各包含两个实验，其中只要有一个实验，或任何一个实验的两个剂量组结果为阳性，就判定该方面的实验结果为阳性。对于NK 细胞活性实验，只要有一个剂量组为阳性，就判定NK细胞活性实验结果为阳性。

1.5 统计分析

采用SPSS15.0 软件进行统计分析，明日叶查尔酮不同剂量组分别与过度训练组和阳性对照组比较，P<0.05具有统计学意义。

 

2 结果与分析

2.1 实验小鼠一般表现

在整个实验过程中，阳性对照组小鼠体毛有光泽，活泼。过度训练组小鼠及明日叶查尔酮各剂量组小鼠在第2 周以后毛发稀疏且蓬乱无光泽，精神委靡，嗜睡。第4 周时，补充明日叶查尔酮中、高剂量组小鼠精神状态恢复，体毛比较洁净，较为活泼。整个实验过程中各组小鼠没有出现死亡情况。

2.2 血清睾酮及血清皮质酮变化

表1 显示，与过度训练组比较，查尔酮中、高剂量组小鼠血清睾酮显著升高(P<0.05)，血清皮质酮显著下降(P<0.05)；与阳性对照组比较，查尔酮低剂量组小鼠血清睾酮显著降低(P<0.05)，血清皮质酮显著升高(P<0.05)。

表1 小鼠血清睾酮及血清皮质酮水平 Table 1 Level of testosterone and serum corticosterone inmice
组别	动物数量	血清睾酮T(nmol/L)	血清皮质酮C(nmol/L)
过度训练组	40	2.69±1.79	679.67±243.52
阳性对照组	40	4.33±1.21	357.68±175.35
明日叶查尔酮低剂量组	40	2.99±1.98△	520.35±198.87△
明日叶查尔酮中剂量组	40	4.48±1.99*	347.54±179.46*
明日叶查尔酮高剂量组	40	4.71±2.40*	361.09±181.49*
注：* 与过度训练组比较P<0.05； △ 与阳性对照组比较P<0.05。

 

2.3 明日叶查尔酮对抗疲劳效果的影响

2.3.1 明日叶查尔酮对肝糖原和肌糖原的影响

由表2 可知，与过度训练组比较，查尔酮中、高剂量组小鼠的肝糖原和肌糖原含量都有显著升高(P<0.05)；与阳性对照组比较，查尔酮低剂量组肌、肝糖原含量显著下降(P<0.05)。

表2 明日叶查尔酮对小鼠肝糖原和肌糖原含量的影响 Table 2 Effect of Ashitaba chalcone on the contents of liver glycogen and muscle glycogen of mice
组别	动物数量	肝糖原含量（mg/g）	肌糖原含量（mg/g）
过度训练组	40	10.54±2.11	1.01±0.02
阳性对照组	40	13.52±2.72	1.52±0.07
明日叶查尔酮低剂量组	40	11.11±1.24△	1.12±0.11△
明日叶查尔酮中剂量组	40	13.08±1.09*	1.43±0.16*
明日叶查尔酮高剂量组	40	14.11±1.21*	1.58±0.05*
注：* 与过度训练组比较P<0.05； △ 与阳性对照组比较P<0.05。

 

2.3.2 明日叶查尔酮对血清尿素氮(BUN)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)的影响

由表3 可知，与过度训练组比较，查尔酮中、低剂量组小鼠的血清BUN、LDH、CK 含量显著降低(P<0.05)；与阳性对照组比较，查尔酮低剂量组LDH、CK 含量显著升高(P<0.05)，BUN 含量有极显著升高(P<0.01)。

表 3 明日叶查尔酮对小鼠血清尿素氮、乳酸脱氢酶和肌酸激酶的影响 Table 3 Effect of Ashitaba chalcone on the concentration of urea nitrogen and activity of lactic dehydrogenase in the blood serurn and liver homogenate mice
组别	动物数量	血清尿素氮BUN(mmol/L)	血清乳酸脱氢酶LDH(U/L)	血清肌酸激酶CK(mmol/L)
过度训练组	40	16.89±4.79	4543.19±517.65	496.38±154.04
阳性对照组	40	11.11±3.42	4197.65±493.47	327.65±110.42
明日叶查尔酮低剂量组	40	15.52±2.48△△	4496.36±458.46△	468.79±109.76△
明日叶查尔酮中剂量组	40	12.11±2.04*	4136.41±397.68*	361.12±111.23*
明日叶查尔酮高剂量组	40	11..44±0.98*	4009.48±122.76	327.19±111.82*
注：# 与过度训练组比较P<0.05；△ 与阳性对照组比较P<0.05，△△与阳性对照组比较P<0.01。

 

2.3 明日叶查尔酮对小鼠体液免疫的影响

2.3.1 明日叶查尔酮对小鼠抗体生成细胞数的影响

由表4 可知，与过度训练组比较，查尔酮中、高剂量组小鼠抗体生成细胞数显著升高(P<0.05，P<0.01)；而与阳性对照组比较，查尔酮低剂量组小鼠抗体生成细胞显著降低(P<0.05)，根据免疫功能判定标准，明日叶查尔酮的小鼠抗体生成细胞数实验结果阳性。

表4 不同剂量明日叶查尔酮小鼠抗体生成细胞测定结果 Table 4 Antibody-producing cells measurement results of Hemolysin measurement of different doses of Ashitaba chalcone
组别	动物数量	溶血空斑数 （1×10/106 脾细胞）
过度训练组	10	142.00±41.20
阳性对照组	10	182.00±40.12
明日叶查尔酮低剂量组	10	156.00±38.21△
明日叶查尔酮中剂量组	10	165.00±38.47*
明日叶查尔酮高剂量组	10	189.00±350.50**
注：* 与过度训练组比较P<0.05；** 与过度训练组比较P<0.01；△ 与阳性对照组比较P<0.05。

 

2.3.2 明日叶查尔酮对小鼠血清溶血素的影响

由表5 可知，与过度训练组比较，查尔酮高剂量组小鼠抗体积数显著升高(P<0.05)；而与阳性对照组比较，查尔酮低、中剂量组小鼠抗体积数显著降低(P<0.05)，根据免疫功能判定标准，明日叶查尔酮的小鼠血清溶血素实验结果为阴性。

表5 不同剂量明日叶查尔酮小鼠溶血素测定结果 Table 5 Hemolysin measurement results of different doses of Ashitaba chalcone
组别	动物数量	抗体积数
过度训练组	10	74.43±11.32
阳性对照组	10	89.91±31.24
明日叶查尔酮低剂量组	10	73.65±29.54△
明日叶查尔酮中剂量组	10	79.51±26.41△
明日叶查尔酮高剂量组	10	88.56±54.16*
注：* 与过度训练组比较P<0.05；** 与过度训练组比较P<0.01；△ 与阳性对照组比较P<0.05。

 

2.4 明日叶对小鼠细胞免疫的影响

2.4.1 明日叶对ConA 诱导的小鼠脾淋巴细胞转化能力的影响

由表6 可知，与过度训练组比较，查尔酮低、中、高剂量组小鼠淋巴细胞转化能力显著升高(P<0.05，P<0.01)，根据免疫功能判定标准，明日叶查尔酮的小鼠脾淋巴细胞转化能力实验结果阳性。

表6 不同剂量明日叶查尔酮小鼠脾淋巴细胞转化实验结果 Table 6 Mouse spleen lymphocyte transformation test result of different doses of in mouse Ashitaba chalcone
组别	动物数量	淋巴细胞增殖能力 （OD 值）
过度训练组	10	0.08±0.02
阳性对照组	10	0.15±0.05
明日叶查尔酮低剂量组	10	0.12±0.02*
明日叶查尔酮中剂量组	10	0.13±0.04*
明日叶查尔酮高剂量组	10	0.16±0.07**
注：* 与过度训练组比较P<0.05；** 与过度训练组比较P<0.01。

 

2.4.2 明日叶对小鼠迟发型变态反应的影响

由表7 可知，与过度训练组相比，查尔酮各剂量组左右耳重量差值没有显著变化；与阳性对照组相比，查尔酮低、中、高剂量组相应指标显著升高(P<0.05)，根据免疫功能判定标准，明日叶查尔酮的小鼠迟发型变态反应实验结果阴性。

表7 不同剂量明日叶查尔酮小鼠迟发型变态反应测定结果 Table 7 Mouse delayed type hypersensitivity test results of different doses of Ashitaba chalcone
组别	动物数量	左右耳重量差值（mg）
过度训练组	10	8.36±1.44
阳性对照组	10	6.24±1.24
明日叶查尔酮低剂量组	10	8.41±1.08△
明日叶查尔酮中剂量组	10	8.22±1.65△
明日叶查尔酮高剂量组	10	8.31±2.08△
注：△ 与阳性对照组比较P<0.05。

 

2.5 明日叶对小鼠NK 细胞的影响

由表8 可知，与过度训练组比较，查尔酮中、高剂量组的NK 细胞活性显著升高(P<0.05)；与阳性对照组比较查尔酮低剂量组NK 细胞活性显著降低(P<0.05)，根据免疫功能判定标准，明日叶查尔酮的小鼠NK 细胞活性测定实验结果阳性。

表8 不同剂量明日叶查尔酮小鼠NK 细胞活性测定结果 Table 8 NK cell activity assay results in mice of different doses of Ashitaba chalcone
组别	动物数量	NK 细胞活性（%）
过度训练组	10	25.25±4.64
阳性对照组	10	29.99±4.39
明日叶查尔酮低剂量组	10	24.99±4.39△
明日叶查尔酮中剂量组	10	28.99±4.39*
明日叶查尔酮高剂量组	10	29.14±6.98*
注：* 与过度训练组比较P<0.05；△ 与阳性对照组比较P<0.05。

 

2.6 明日叶对小鼠单核巨噬细胞吞噬功能的影响

2.6.1 明日叶对小鼠单核巨噬细胞碳廓清的影响

由表9 可知，与过度训练组比较，查尔酮高剂量组小鼠吞噬指数显著升高(P<0.05)；与阳性对照组比较，查尔酮低、中剂量组吞噬指数显著降低(P<0.05)，根据免疫功能判定标准，明日叶查尔酮的小鼠巨噬细胞碳廓清测定实验结果阴性。

表9 不同剂量明日叶查尔酮小鼠单核巨噬细胞碳廓清测定结果 Table 9 Mouse monocyte macrophage carbon clearance test results of different doses of Ashitaba chalcone
组别	动物数量	吞噬指数
过度训练组	10	5.25±1.45
阳性对照组	10	6.23±1.66
明日叶查尔酮低剂量组	10	5.09±1.21△
明日叶查尔酮中剂量组	10	5.31±1.28△
明日叶查尔酮高剂量组	10	6.31±1.39*
注：* 与过度训练组比较P<0.05；△ 与阳性对照组比较P<0.05。

 

2.6.2 明日叶查尔酮对小鼠的腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力的影响

由表10 可知，与过度训练组比较，查尔酮高剂量组的腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬率和吞噬指数都显著升高(P<0.05)；与阳性对照组比较，查尔酮低、中剂量组相应指标显著降低(P<0.05)，根据免疫功能判定标准，明日叶查尔酮的小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力的实验结果阴性。

表10 小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞测定结果 Table 10 Mouse peritoneal macrophage phagocytosis results of different doses of Ashitaba chalcone
组别	动物数量	吞噬率（%）	吞噬指数
过度训练组	10	17.25±5.45	0.22±0.12
阳性对照组	10	24.43±4.98	0.45±0.11
明日叶查尔酮低剂量组	10	18.33±3.87△	0.21±0.12△
明日叶查尔酮中剂量组	10	19.19±4.62△	0.23±0.11△
明日叶查尔酮高剂量组	10	10 25.31±7.36*	0.44±0.09*
注：* 与过度训练组比较P<0.05；△ 与阳性对照组比较P<0.05。

 

3 讨论

运动性疲劳是运动员经常遇到的一个问题。伴随着运动性疲劳的发生，将出现一系列影响运动员身体健康的问题，甚至导致运动能力的急剧下降。其中，免疫力下降问题尤为突出。例如，运动员经常受到上呼吸道感染、单核细胞增多症的困扰[7]。这些疾病都与机体免疫力低下有直接关系[8,9]。

因此，运动性疲劳与机体免疫力下降常常相伴而生，成为运动医学界的难题。西药副作用大，又面临运动员兴奋剂检测的问题。因此，科学家试图从药食两用的植物性食物中寻找能延缓运动员疲劳产生，预防和改善运动员免疫功能的功能性食品。

明日叶是传统的药食两用植物[10]，早在李时珍的《本草纲目》中就有记载。为了充分挖掘其功效，本研究通过建立过度训练的动物模型全面分析了明日叶中主要功效物质查尔酮对机体疲劳及免疫功能的影响。

参考相关文献[5]并根据预实验情况，建立了本实验的小鼠过度训练模型。通过测定血清睾酮、血清皮质酮含量可以判断过度训练模型建立是否成功[11,12]。经测定，与空白对照组比较，过度训练模型小鼠的血清皮质酮显著增高，血清睾酮显著降低，而小鼠在过度训练后出现明显精神萎靡、睡眠障碍、食欲不振等症状。一系列指标都表明，本研究建立的过度训练动物模型是成功的。为了更加客观、准确的反映明日叶查尔酮抗疲劳、增加免疫力的能力，在本实验中以药效明确的抗疲劳、增加免疫力的药物作为阳性对照。

肌酸激酶(CK)是骨骼肌中重要的代谢酶。正常情况下肌细胞膜结构完整，CK 不会透过细胞膜[13,14]。当身体状况改变，比如运动时，就有可能使CK 通过肌细胞膜进入血液，导致血液中的CK 升高。尿素氮(BUN)是蛋白质和氨基酸等含氮物质的代谢产物[15,16 ]。运动训练使机体内的蛋白质代谢水平处于高位，BUN 明显增加。

因此，BUN 常被作为反映运动量、身体机能和机体对训练负荷承受能力的指标。乳酸脱氢酶(LDH)在催化糖代谢的丙酮酸和乳酸间的相互转变中起重要作用。剧烈运动后，血液及组织中乳酸的大量产生使人体感到疲劳。

通过测定LDH 含量可以评定乳酸生成量，从而反映机体对运动负荷的适应程度[17]。本实验结果中，与空白对照组比较，过度训练组小鼠血清CK、BUN、LDH 水平显著升高，说明过度训练对机体产生了极大影响，而补充一定剂量明日叶查尔酮后，相应指标均显著降低，与阳性药物对照组比较没有显著差异。研究结果表明，中、高剂量组明日叶查尔酮能够起到抗疲劳的作用。糖原是肌肉活动中能量的主要来源，大强度运动使糖原耗竭，肌糖原消耗的同时，为了维持血糖水平，肝糖原储备量随之减少[18-20]。因此糖原含量能够说明疲劳发生的快慢或程度[21,22]。从实验结果可知，过度训练组和查尔酮低剂量组的肌糖原和肝糖原含量显著低于空白对照组，而查尔酮中、高剂量组与阳性对照组比较没有显著差异。研究结果表明，中、高剂量组明日叶查尔酮可以通过增加糖原储备给机体提供更多能量，以达到抗疲劳目的，对延缓疲劳的产生具有良好的保健作用。

NK 细胞是一类大颗粒淋巴细胞，它具有直接杀伤靶细胞的作用。现已证实，NK 细胞不仅在机体的细胞免疫中占重要作用，而且在运动过程中免疫系统的机能变化中占重要位置。在长时间耐力性训练后NK 细胞浓度持续下降[23]。

本实验结果表明，中、高剂量查尔酮可以显著增加过度训练小鼠NK 细胞水平，提高机体免疫力。

抗体生成细胞检测实验的原理为，绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞悬液与一定量绵羊红细胞混合，经补体参与，使分泌抗体的脾细胞周围的绵羊红细胞溶解，形成肉眼可见的空斑[24]。溶血空斑数可反映抗体生成细胞数。抗体生成细胞数通常作为反映体液免疫情况的指标。当机体进行大强度运动产生运动疲劳时，通常抗体生成细胞数减少，造成免疫力降低。本实验结果表明，中、高剂量查尔酮可以显著提高过度训练小鼠抗体生成细胞数，说明查尔酮可以通过增加抗体生成细胞数增强机体免疫。脾脏是体内的最大外周免疫器官，是T、B 淋巴细胞定居及接受抗原刺激进而产生免疫应答的重要场所，在机体的免疫防御、免疫调节、免疫修复及免疫监视等多环节都发挥着重要的作用[25]。本实验结果表明，中、高剂量查尔酮能够显著促进过度训练小鼠脾淋巴细胞成熟、转化，进而提高机体细胞免疫能力。在免疫功能的评价中，根据已有的规范标准[6]，本实验进行了体液免疫、细胞免疫、单核-巨噬细胞功能和NK 细胞活性四个方面的评定。其中，体液免疫、细胞免疫、NK 细胞活性的实验结果均为阳性。因此，可以判定明日叶查尔酮确实能够改善过度训练小鼠的免疫功能。

 

4 结论

明日叶查尔酮能够通过增加机体糖原储备，抵抗和延缓疲劳产生，通过增加NK 细胞活性、提高抗体形成细胞数量和脾脏淋巴细胞转化能力来增强机体的免疫能力，而且其功效与已有的有明确药效的改善机体免疫力和抗疲劳的药物相类似。因此，本研究为充分利用明日叶，将明日叶查尔酮开发为增强机体免疫力、抗疲劳的运动营养补充剂提供了参考。

参考文献

[1] 赵阳. 明日叶查尔酮对2 型糖尿病大鼠葡萄糖转运体表达的影响[D]. 青岛: 青岛大学, 2013: 14.

[2] 王庆平, 曹卿, 钟进义, 等. 明日叶查尔酮对2 型糖尿病大鼠胰岛素受体表达的影响[J]. 中国食物与营养, 2013, (19)1: 69-72. DOI:10.3969/j.issn.1006-9577.2013.01.018.

[3] 矫玮. 剧烈运动对机体免疫功能的影响以及检测与调节方法的研究[M]. 北京: 北京体育大学出版社, 2003: 135-138.

[4] 张建伟, 刘海燕, 张淼. 茶多酚对大强度耐力运动小鼠免疫功能的影响[J]. 食品工业科技, 2012, 33(11): 367-369.

[5] 顾明. 过度训练对大鼠肠道黏膜形态结构的影响及谷氨酞胺、大豆多肽的干预作用[D]. 扬州, 扬州大学, 2008: 27, 44-46.

[6] 中华人民共和国卫生部. 保健食品检验与评价技术规范[M]. 北京: 中华人民共和国卫生部, 2003.

[7] Fujiwara S, Matsuda G, Imadome K I. Humanized Mouse Models of Epstein-Barr Virus Infection and Associated Diseases[J]. Pathogens,

2013, 2(1): 153-176. DOI:10.3390/pathogens1010153.

[8] 华岩, 邓武装, 王春亮, 等. 牡蛎多糖对力竭运动小鼠血免疫球蛋白、T 淋巴细胞亚群、自然杀伤细胞、自然杀伤T 淋巴细胞的影响[J]. 中国康复医学杂志, 2014, 29(6): 571-573. DOI: 10.3969/j.issn.1001-1242.2014.06.016.

[9] 袁红, 张淑芳, 贾绍辉, 等. 黄芪生物活性及其在保健食品中的应用研究进展[J]. 食品科学, 2014, (35)15: 330-334. DOI:10.7506/spkx1002-6630-201415065

[10] 王庆平, 曹卿, 钟进义, 等. 明日叶查尔酮对2 型糖尿病大鼠胰岛素受体表达的影响[J]. 中国食物与营养, 2013, (19)1: 69-72. DOI:10.3969/j.issn.1006-9577.2013.01.018.

[11] 李秀娟, 秦旸. 我国女子足球运动员赛前机能综合评价系统的构建研究[J]. 天津体育学院学报, 2014, 29(4): 365-368. DOI:10.3969/j.issn.1005-0000.2014.04.018

[12] 张志成, 池建, 李兵. 我国优秀男子龙舟运动员身体机能评价模型的建立[J]. 北京体育大学学报, 2014, 37(3): 128-132.

[13] 崔玉鹏, 杨则宜. 血清CK 活性变化与运动导致的骨骼肌损伤[J]. 中国运动医学杂志, 2004, 23(3): 343-346. DOI:10.3969/j.issn.1000-6710.2004.03.029

[14] Jemni M, Sands W A, Friemel F. Effect of active and passive recovery on blood lactate and performance during simulated competition in high level gymnasts[J]. Canadian Journal of Applied Physiologyrevue canadienne de physiologie appliquee, 2003, 28(2): 240-56. DOI:10.1139/h03-019

[ 1 5 ] 王强, 龙洁, 李贵杰, 等. 南瓜皮粗多糖对小鼠抗疲劳功效研究[ J ] . 食品科学, 2 0 1 4 , 3 5 ( 1 3 ) : 2 5 4 – 2 5 7 . D O I :10.7506/spkx1002-6630-201413050

[16] 李莉, 赵效国, 马龙, 等. 黑加仑提取物抗疲劳作用的动物实验研究[J]. 营养学报, 2008 30(5): 499-501. DOI:10.3321/j.issn:0512-7955.2008.05.019

[17] Wang S Y, Camp M J, Ehlenfeldt M K. Antioxidant capacity and α-glucosidasa inhibitory activity in peel and flesh of blueberry (Vaccinium spp.) cultivars[J]. Food Chemistry, 2012, 132(4): 1759-1768. DOI: 10.1016/j.foodchem.2011.11.134.

[18] 朴美子, 郭芳言, 王莹. 蛹虫草黄豆粉发酵饮料对小鼠免疫及降血脂功能的影响[J]. 中国食品学报, 2016, 16(1): 42-47.

[19] 康连虎, 卞宝国, 李吕木, 等. 发酵小麦制酒精残渣中寡肽的抗氧化及免疫活性[J]. 食品科学, 2015, 12(3): 44-54.

[20] Mikami N, Matsushita H, Katot, et a1. Calcitonin gene-related peptide is an important regulator of cutaneous immunity: effect on dendritic cell and T cell functions[J]. Journal of Immunology, 2011, 186(12): 6886-6893. DOI: 10.4049/jimmunol.1100028.

[21] Takenaka N, Yasuda N, NIhata Y, et al. Role of the guanine nucleotide exchange factor in Akt2-mediated plasma membrane translocation of GLUT４in insulin‐stimulated skeletal muscle[J]. Cell Signal, 2014, 26(11): 2460-2469. DOI：10.1016/j.cellsig.2014.07002.

[22] 张雅莉, 黄晓旭, 蔡美琴. 枸杞多糖缓解小鼠体力疲劳作用研究及机制探讨[J]. 营养学报, 2015, 37(6): 616-618.

[23] 李琦, 梅其柄, 张明杰, 等. 一组生物活性多糖对人NK 细胞免疫活性的影响[J]. 食品科学, 2013, 34(1): 315-318.

[24] 蒋蕊, 考书娟, 徐小娟, 等. 槲皮素对免疫低下小鼠体液免疫功能的影响[J]. 青岛农业大学学报, 2011, 28(2): 118-120. DOI:10.3969/J.ISSN.1674-148X.2011.02.010.

[25] 徐寅. 保留脾脏的胰体尾切除术后并发症的早期观察与护理[J] . 实用临床医药杂志: 护理版, 2008, 4(1): 72-73,75. DOI:10.3969/j.issn.1672-2353.2008.02.03.